下面为您介绍离心机的主要元件是转头,它是高速离心时转动的部件。
转头可以被固定在离心机上,也可以是一个离心机使用多个转头,将它们装在称为主轴的部件上。
离心机转头通常还带有一个盖子,能紧紧拧上盖住,防止样品飞出来。
许多离心机会有一个制冷单元,它可以保持内部温度在离心时得到控制。
离心机上还有旋钮或按钮用以输入每次离心所需要的参数:
包括离心时间、温度、和离心快慢,它可以是以速度或以相对离心力为单位。
离心速度用RPM来计量,即每分钟的旋转次数。RPM值有时有误导性,因为造成颗粒从混合物中分离出来的不是离心的速度,而是作用在这些颗粒上的作用力。
这种作用力与离心机转头的半径相关,由于不同的离心机有不同的转头大小,这样在同一个RPM速度下,产生的作用力会有不同。
离心力也可以用RCF相对离心力来定量。RCF通常表现为地球重力加速度的倍数。
RCF的计算公式是转头半径乘以角速度平方,然后除以地球的重力加速度。
RCF通过下面的公式和RPM相关,其中r代表离心机的半径,以厘米为单位。
对该公式的使用可能会影响到实验的成功或失败,但您不必在每个新的操作中都采用这种计算方法。离心机通常都附带了图表来帮助简单地换算RCF和RPM。用一个尺子连接离心机的半径和一个已知的RPM数值,就可以得到RCF数值。
离心操作
在开始离心您的样品之前,先要考虑温度。如果您在使用一个冷冻离心机,那么在开始前需要让仪器内部的温度达到您的理想值,或者用别的方法来给转头降温。
离心即将开始前,需确定您所有的管盖都盖紧不会松开了。
在将离心管放入转头时,要保证每个样品和另一个相对位置的样品重量一致。
如果您只有一个离心管,那就要找到另一个等重的离心管来保证平衡。
如果您有三个同样重量的离心管,可以将它们摆成一个三角位置以保证相互平衡。
重量平衡在离心中非常重要。离心机的转头在高速运动中有很高的动态能量。如果没有正确平衡好,整个离心单位会脱离它所在的位置,造成严重的损害。
一旦您确定转头和盖子都固定好了,就可开始离心,在速度达到您设定的转速前不要离开。
离心结束后,您应当会看见您的生物学样品位于离心管底部的沉淀中。它已经从称为上清的余液中分离出来了。
可以通过倾倒,也就是直接倒出来去除上清,也可将上清吸出,就是用真空吸力将其吸出。
纯化的样品可以被重新放回溶液中,这个过程称之为重悬。重复离心细胞,然后吸出上清留下细胞,再用缓冲液重悬细胞,这个过程称之为细胞洗涤。